二手HPLC液相色譜可以分為液/固吸附色譜、液/液分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜四類。其基本理論和定性定量分析方法與氣相色譜基本相同。二手HPLC液相色譜儀五大組成系統 :輸液系統、進樣系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統。
二手HPLC液相色譜的輸液系統包括流動相貯存器、高壓泵和梯度淋洗裝置。流動相貯存器為不銹鋼或玻璃制成的容器,可以貯存不同的流動相。高壓泵是液相色譜儀重要的部件之一。由于液相色譜儀所用色譜柱直徑細,固定相粒度小,流動相阻力大,因此,必須借助于高壓泵使流動相以較快的速度流過色譜這。高壓泵需要滿足以下條件:能提供150-450kg/cm2的壓強;流速穩定,流量可以調節;耐腐蝕。目前所用的高壓泵有機械泵和氣動放大泵兩種。梯度淋洗裝置可以將兩種或兩種以上的不同極性溶劑,一定程序連續改變組成,以達到提高分離效果,縮短分離時間的目的。它的作用與氣相色譜中的程序升溫裝置類似。
梯度淋洗裝置分為兩類:一類叫外梯度裝置;一類內梯度裝置。外梯度裝置是流動相在常壓下混合,靠一臺高壓泵壓至色譜柱;內梯度裝置是先將溶劑分別增壓后,再由泵按程序壓入混合室,再注入色譜柱。
二手HPLC進樣器是將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。
分離系統進樣系統一般液相色譜多采用六通閥進樣。先由注射器將樣品常壓下注入樣品環。然后切換閥門到進樣位置,由高壓泵輸送的流動相將樣品送人色譜柱。樣品環的容積是固定的,因此進樣重復性好。
二手HPLC分離系統包括色譜柱、連接管、恒溫器等。色譜柱是液相色譜儀的心臟。它是由內部拋光的不銹鋼管制成,一般長10—50cm,內徑2—5mm,柱內裝有固定相。液相色譜的固定相是將固定該涂在擔體上而成。擔體有兩類:一類是表面多孔型擔體;另一類是全多孔型擔體。
近年來又出現了全多孔型微粒擔體。這種擔體檢度為5—10um,是由nm級的硅膠微粒堆積而成,又叫堆積硅珠。由于顆粒小,所以柱效高,是目前廣泛使用的一種擔體。在液相色譜分析中,適當提高柱溫可改善傳質,提高桂效,縮短分析時間。因此,在分析時可以采用帶有恒溫加熱系統的金屬夾套來保持色譜拄的溫度。溫度可以在室溫到60℃間調節。
二手HPLC液相色譜的檢測器很多,常用的有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器等。
二手HPLC對色譜數據進行處理,并參與HPLC儀器的自動控制。